Когда сдавать анализ на клещевой боррелиоз?

Полимеразная реакция цепи

Содержание

• Полимеразная реакция цепи1
• Иммуноферментное исследование2
• Расшифровка результатов3
• Культуральный метод4
• Методика Вестерн-блот5
• Когда и как проходят диагностику?6

Этот анализ является современным способом выявления различного рода заболеваний, в том числе и боррелиоза. В последнее время все чаще отдается предпочтение именно ему. Среди преимуществ можно отметить следующее:

• технологичность забора материала;
• высокая надежность результатов;
• чувствительность диагностики выше, чем у других применяемых методик;
• может не только выявить инфекционного возбудителя, но и определить его количество.

Кроме того, анализ клеща методом ПЦР можно проводить, даже имея его кусочки, а вот для микроскопической диагностики нужно целое и живое насекомое.

Если брать во внимание, что лабораторное высевание культур занимает в среднем от 3-х до 4-х недель, то результаты ПЦР из любого сданного материала можно узнать уже через 2-3-е суток.

Получение положительного результата ПЦР говорит о наличии заражения спирохетой и о том, что в организме происходит развитие болезни Лайма или данный недуг был у пациента раньше.

Есть вероятность ложнопожительного результата анализа ПЦР на клещевой энцефалит и боррелиоз. Такое может произойти на фоне гепатита В и мононуклеоза, в этом случае будут низкие титры антител. Также при наличии сифилиса или возвратного тифа – анализ укажет на высокие титры антител.

Итогом анализа могут быть два варианта – “обнаружено” или “не обнаружено” – это означает, что в организме пациента есть инфекция или ее нет, отрицательный результат может выявиться при содержании незначительного количества фрагментов микробных ДНК.

Для исследования методом ПЦР сдаются различные биологические материалы:

• ликвор – цереброспинальная, или спинномозговая жидкость;
• венозная кровь;
• урина;
• слюнная жидкость;
• соскобы слизистой оболочки;
• кожные чешуйки с места локализации эритемы;
• сыворотка крови.

Иммуноферментное исследование

Данный анализ крови на клещевой боррелиоз не новый и является самым распространенным среди имеющихся способов нахождения в организме инфекционных возбудителей. Это серологическое лабораторное исследование, которое выявляет наличие антител к боррелиям в плазме крови, лишенной фибриногена, т.е. сыворотке. Для этих целей и используется анализ ИФА (иммунноферментный).

Для исследования берется у одного пациента сыворотка с промежутком времени в 3-4-е недели. Это так называемая “парная” сыворотка.

Чтобы результат был максимально точен, необходимо соблюдать определенные правила:

• перед забором анализа лучше избегать стрессов, чрезмерных физических нагрузок;
• за 3-е суток не употреблять алкогольных напитков, жирной, острой пищи;
• перед анализом не стоит принимать каких-либо лекарственных средств, гормональных контрацептивов;
• если используются жизненно важные препараты, то необходимо предупредить об этом лечащего врача;
• нельзя сдавать кровь на иммуноферментный анализ сразу после проведения рентгенологического исследования, УЗИ, физиопроцедур;
• не курить минимум за 3 часа до забора крови;
• рекомендовано перед анализом побыть минут 20 в спокойном состоянии, посидеть;
• кровь забирается на голодный желудок утром (последний прием пищи должен быть не раньше, чем за 6-8 часов до сдачи), необходимо учитывать, что все напитки, кроме воды, особенно содержащие сахар, являются едой.

Кровь на клещевой баррелиоз набирается из вены в стерильную пробирку, иногда используются пробирки со специальным гелем. После забора кровотечение останавливается путем надавливания ватным шариком. Если при повышенной чувствительности кожных покровах образуется гематома, то избавиться от нее поможет согревающий компресс с рассасывающим эффектом.

Если анализ показал наличие IgM, то значит в организме протекает острый воспалительный процесс инфекционного характера. При поздних стадиях заболевания обнаруживается повышенный уровень антител, относящихся к классу IgG. Если последний показатель долгое время не снижается, значит можно говорить о переходе инфекции в хроническую форму.

Расшифровка результатов

Количество антиборрелиозных агентов IgG класса к патогенным микробам, вызывающим боррелиоз:

• показатель до 16 – инфекции нет;
• от 16 до 22 – есть сомнения;
• 22 и выше – результат положительный.

Anti-Borrelia IgM:

• ниже 0,8 – боррелий не обнаружено;
• в рамках 0,8-1,1 – анализ сомнительный;
• выше 1,1 – положительный.

Стоит отметить, что если отрицательный серологический анализ получен в начале развития заболевания, то не значит, что в организме нет боррелиоза. Такая особенность связана с тем, что антитела к боррелиозным антигенам могут определяться только через 3-6 недель после появления типичных симптомов. В этом случае необходима пересдача материала.

При сомнительном результате человеку рекомендуют сдать повторный анализ через 7 дней, так как он чаще всего выявляется на начальной стадии инфицирования или на фоне приема антибиотиков.

Контрольные анализы рекомендуется сдавать в тех же условиях, что и первые, обращаясь к услугам той же лаборатории, обязательно в утреннее время и с соблюдением определенных правил.

У некоторого количества пациентов (в среднем у 7-8%), не имеющих в организме боррелий, анализ повышен. Это бывает в случае развития эндокардита, мононуклеоза инфекционного происхождения или же наличии спирохет другого типа.

Иммуноглобулины М (IgM) могут выявляться через 14-28 дней со времени инфицирования. Их образование происходит перед появлением иммуноглобулинов, относящихся к G классу. Но у некоторых пациентов синтез IgM может происходить с опозданием или же не происходить вообще.

Кровь на клещевой энцефалит и боррелиоз в этом случае сдается не раньше трех недель после укуса.

Культуральный метод

Получение результата основывается на изоляции болезнетворного микроба, в этом случае – боррелии, из биоматериала на питательную среду. Для анализа подходит практически любая жидкость или ткань человеческого организма – кровь, спинномозговая, внутрисуставная, лимфатическая жидкость, ткани биопсии и др.

Боррелии очень требовательные в вопросах культивирования, поэтому ученые долгие годы создавали подходящую среду, котораяносит название Barbour-Stoenner-Kelly.

Основными условиями для успешного культивирования являются:

• получение биоматериала в начале развития инфекции;
• стерильность во время забора;
• скорейшая транспортировка в лабораторию и помещение на питательную среду.

Выявить боррелиоз таким методом удастся только в том случае, если больной еще не начал курс антибиотикотерапии.

Самый точный результата анализа выявляется из биоптатов, полученных с области укуса – в 60% случаев удается изолировать микробы. При хроническом атрофическом акродерматите (ХААД) это процент выше и достигает 90%.

Подобный анализ крови на боррелиоз имеет самый низкий показатель положительного результата – от 1% до 3%, при заборе ликвора или внутрисуставной жидкости эта цифра варьируется от 15 до 25%.

Считается, что культуральная методика, не смотря на все свои преимущества, не подходит для практического использования. Исследование может длиться от 3-х до 10 недель, стоит дорого, а по эффективности все же уступает наиболее современным способам. Чаще всего ее применяют для научных изысканий, для получения боррелиозной биомассы, котораянеобходима для исследовательской деятельности.

Методика Вестерн-блот

На сегодняшний день считается самым точным диагностическим методом для выявления боррелий. Он основывается на аналитическом подходе к определению в материале специфичных белков.

Прежде всего, применяется электрофорез для структурного разделения белков. Затем их переносят на специальную мембрану, а после применяются детекторы с антителами, специфичными к данному белку.

Вестерн-блоттинг отличается от предыдущего метода тем, что серологическое исследование определяет общее количество антител, специфического и неспецифического характера. Тестирование может дать положительный результат из-за того, что в анализе присутствуют антитела к неспецифическим антигенов.

Методика же Вестерн-блота высокоспецифичная. Выявляя антитела, она определяет против какого типа возбудителя они вырабатываются. Это позволяет исключить влияние на результат анализа перекрестных реакций, связанных с неспецифичными антигенами.

Если рассматривать чувствительность, белковый блоттинг несколько проигрывает анализу ИФА, например, когда в организме пациента присутствует вирус иммунодефицита, он может дать отрицательный ответ.

Возможность получения ложноположительного результата в иммуноферментном исследовании при наличии ВИЧ требует комплексной диагностики, учитывая ИФА, Вестерн-блоттинг, клиническую картину и эпидемиологическое состояние.

Анализ на иммуноглобулин G.

В этом случае кровь на боррелиоз берут, чтобы определить стадию развития инфекции, иммуноглобулин отвечает за вторичный ответ иммунной системы. Существует 3 фазы: острое развитие, хроническое и инфекционное. В норме показатели результата должны быть следующими:

• у взрослых пациентов – от 7 до 16;
• подростков от 11 до 16 лет – от 6,98 до 15,6;
• детей от 5 до 10 лет – от 5,04 до 9,16;
• детей от 2-х до 5 лет – от 4,53 до 9,16.

Пониженное количество иммуноглобулина G может сигнализировать о наличии иммунодефицита.

Метод реакции непрямой флюорисценции (РНИФ).

Этот способ позволяет выявлять антитела к возможным антигенам, путем окрашивания биоматериала флюорохромом и изучения его под микроскопом с люминесцентным освещением.

Обладает некоторыми преимуществами перед методом РИФ, т.к. может не только выявить антигены, но и определить титры антител. Повышенная чувствительность этого метода позволяет, применяя одинаковую сыворотку, обнаруживать различные антигены вирусного и бактериального происхождения.

На первом этапе исследования антитела взаимодействуют с антигеном, на втором происходит ферментативная индикация антигенов.

Прямая микроскопия.

Для данного анализа сдается кровь, ликвор, ткани, полученные путем биопсии, клещевой гомогенизат. Результаты микроскопического исследования не совсем достоверны, после окрашивания микробы утрачивают структурность и сложно определить: патогенные они или нет. Для данного метода при низком содержании боррелий в крови нередко биологическую жидкость концентрируют, пропуская ее через центрифугу.

При данном способе выявления баррелиоза присутствует вероятность ложноотрицательного результата.

Диагностика боррелиоза

При появлении подозрений на наличие инфекционного заболевания (например, проявлении характерных симптомов) необходимо обратиться к врачу-инфекционисту для сдачи анализов на клещевой боррелиоз. Для определения заболевания врач для начала исследует проявление клинических симптомов болезни, после чего назначает ряд лабораторных диагностик :

1. 
   ПЦР-диагностика (полимеразная цепная реакция) – эффективный метод диагностики заболеваний, заключающийся в многократном увеличении количества ДНК возбудителя. Именно благодаря этому чувствительность данного метода настолько велика, что хватит даже единственной копии ДНК возбудителя в образце.
   

   Материалом для ПЦР анализа могут быть любые биологические жидкости в зависимости от заболевания. В случае боррелиоза – это биоптат, моча, ликвор.

2. 
   Анализ на антитела класса IgM и IgG (иммуноферментный анализ)

   Данный вид анализа подразумевает взятие анализа крови на боррелиоз.

   Иммуноглобулины – особые гликопротеины организма человека, обладающие способностью связываться с антигенами.

   Повышение Ig M может в первую очередь свидетельствовать о наличии вирусной или бактериальной инфекции, так как этот класс иммуноглобулинов отвечает за формирование первичного иммунного ответа. Понижение его уровня наблюдается при проведении лучевой терапии, лимфомах, гаммапатиях.

   Анализ на иммуноглобулин G проводится для выявления стадии заболевания, так как он ответственнен за осуществление вторичного иммунного ответа. Различают три фазы: острая, хроническая и инфекционная.

   Нормальные показатели — 7,0-16,0. Понижение его количества в крови может служить диагностическим признаком иммунодефицитов.

3. 
   РНИФ (реакция непрямой флюорисценции) – этот метод диагностики состоит в обработке материала антителами, мечеными флюорохромом, после чего наблюдаемый в люминесцентном микроскопе. Используемый материал: кровь.

Метод РНИФ наиболее распространен в России, как метод диагностики болезни Лайма.

Так когда же сдавать анализы на боррелиоз после укуса? Выполняются эти анализы в разное время. Так, ПЦР-диагностика проводится спустя 10 дней после укуса клеща, а иммуноферментный анализ и РНИФ через месяц.

Важно понимать что расшифровку анализов на боррелиоз может выполнить только опытный врач инфекционист, иначе есть риск неверной интерпретации.

Как обычно сдается анализ крови на боррелиоз? Для этого необходимо обратиться в поликлинику по месту жительства или специализированную лабораторию где берут анализ на болезнь Лайма, например Инвитро. Кровь берется из вены.

Всегда при укусе клеща есть вероятность заразится не только этим заболеванием, но и энцефалитом. Самое верное решение в этом случаем сдавать анализ крови на боррелиоз и на клещевой энцефалит.

Пункты серопрофилактики проводят анализ клеща на боррелиоз. Для этого его надо поместить в небольшой стеклянный сосуд с плотной крышкой, предварительно положив туда намоченную вату (для того чтобы клещ не высох). Это имеет смысл делать только если клещ живой и не разорван на части.

Также важно знать что исследование клеща возможно лишь только в течении 24 часов с момента снятия. В этом же пункте можно сдать кровь на баррелиоз.

Анализ крови на боррелиоз

Увидеть боррелии довольно трудно, поэтому используются косвенные методы. Самый приемлемый способ – серологические тесты. Берётся венозная кровь и исследуется на наличие антител к спирохете. В качестве дополнения исследуются также синовиальная и спинномозговая жидкости. Клеща нужно принести в лабораторию непосредственно после снятия с тела, поместив его в контейнер для биоматериалов или в пробирку.

Существует несколько методов анализа крови на боррелиоз. Расшифровка представлена ниже.

• Хемилюминесцентный иммуноанализ позволяет исследовать сыворотку венозной крови на наличие в ней IgG и IgM к возбудителю. Это главный способ диагностики, но провести его нужно через 2-4 недели после укуса, когда в крови появятся антитела.
• Иммуноблот (вестерн-блот) – даёт точную диагностику у пациентов с симптомами болезни Лайма, но отрицательные результаты иммуноанализа. Например, у тех, кто уже переболел боррелиозом и сохранил в крови антитела.
• ПЦР с детекцией в режиме реального времени применяется тогда, когда серологические анализы неинформативны.
• ПЦР-исследование насекомого позволяет найти в клеще фрагменты ДНК болезнетворных возбудителей.

Так как боррелиоз получает развитие не сразу, нужно сдавать анализы в определённые сроки. При спешке может быть получен ложный отрицательный результат. Пик концентрации антител отмечается через три месяца. Перед тем как сдать анализ крови на энцефалит и боррелиоз, за четыре часа следует отказаться от курения и не принимать пищу.

Результаты анализов могут быть как качественными («обнаружено» или «не обнаружено»), так и количественными, то есть с указанием количества антител.

Лабораторное подтверждение клещевого боррелиоза

Лабораторная диагностика этого клещевого заболевания начинается, разумеется, со сдачи на анализ самого клеща. Клещ доставляется в лабораторию обязательно в пробирке или в банке с плотно закрытой крышкой. Раньше можно было исследовать только лишь живого клеща, в настоящее время клещ может быть как живым, так и мертвым. Единственное, что нужно соблюдать — избегать высушивания клеща. В лаборатории из клеща готовится препарат, в котором с помощью полимеразной цепной реакции определяются фрагменты наследственного материала возбудителю боррелиоза. Чаще всего этот анализ проводят совместно с диагностикой клещевого энцефалита.

Очень важно понимать, что даже зараженный клещ не всегда передает заболевания человеку, но в том случае, если при исследовании клеща обнаружена какая-либо инфекция, необходимо срочно, не дожидаясь первых симптомов, обязательно обратиться к инфекционисту.

ИФА – обнаружение антител

Этот анализ крови на боррелиоз проводится в первую очередь, и особенно при типичном течении заболевания и при наличии клещевой эритемы. Специальной подготовки пациентов, как обычно, не требуется, самое главное, чтоб кровь была взята натощак.

Расшифровка анализа на боррелиоз при проведении ИФА выдается в трех возможных вариантах: положительный, отрицательный и сомнительный:

• положительное значение выявляется в том случае, если пациент болен свежим боррелиозом, поскольку иммуноглобулины класса М всегда знаменуют собой первичный и быстрый иммунный ответ.

Разброс значений колеблется от 50 до 90% достоверности. В том случае, если человек переболел, или в настоящее время болеет другой болезнью, вызванный спирохетами, например, тем же сифилисом, то у него может быть ложноположительная реакция на боррелиоз. Иногда она возникает также при вирусном поражении, при инфекционном мононуклеозе, при бактериальном эндокардите и при другой патологии.

Нужно помнить, что любое определение иммуноглобулинов в крови предполагает не нахождение возбудителя в крови, а лишь следы иммунного ответа организма на его внедрение, которые отражаются в виде специфических лабораторных показателей. И в том случае, если в организме что-либо нарушено, то результат может не соответствовать истине.

• Отрицательное значение этого анализа может говорить как о полном здоровье, так и слишком раннем периоде инфицирования.

Если человек всё-таки утверждает, что его кусал клещ и есть наличие эритемы, то через 3 недели необходимо повторить исследование. Также отрицательный результат может быть в том случае, если пациента сразу, после укуса клеща начали лечить с профилактической целью (превентивное лечение), и практически все спирохеты, которые являются очень нестойкими микроорганизмами, погибли.

• В том случае, если результат сомнительный, то диагноз не выставляется, а реакцию рекомендуется повторить в динамике.

Если анализ крови на боррелиоз с помощью серологического метода исследования не помог выявить антитела к возбудителю, то тогда рекомендуется выполнить исследование ПЦР.

Когда нужно сдавать анализ на боррелиоз?

Каждый вирус и бактерия имеют набор ДНК, который выявляет иммуноанализ или ПЦР. Боррелиоз развивается не сразу, вирус циркулирует в крови несколько дней, прежде чем размножиться и попасть в ЦНС. Поэтому тест выполняют во временные промежутки, предписанные врачом.

Через 2-4 недели после укуса клеща сдают ИФА или ПЦР. Если исследование провести заранее, возможен ложноотрицательный результат. Для подтверждения диагноза сдают повторный тест.

Читать:   Анализ на тестостерон у мужчин и женщин: как и где правильно сдавать?

Болезнь Лайма имеет несколько вариантов симптоматики в зависимости от стадии инфекции.

1. Образование круговой эритемы вокруг места укуса. Она расширяется. Кожа становится красной, чешется, шелушится. Образуются участки омертвевшей ткани. Появляются вторичные эритемы.
2. Отсутствие эритемы. Присутствуют признаки энцефалита. К ним относится лихорадка, интоксикация, симптомы невралгии.

В разгар болезни появляются признаки поражения ЦНС:

• смена настроения от возбудимости до подавленности;
• отсутствие чувствительности в верхних и нижних конечностях;
• обильная рвота;
• чувствительность к свету;
• припадки по типу эпилепсии;
• характерная поза для энцефалита (лёжа на боку с запрокинутой головой).

Что может повлиять на результат анализа?

Что может влиять на результат?

• Другие инфекции: сифилис, лептоспироз, возвратный тиф, ВИЧ-инфекция, мононуклеоз и аутоиммунные расстройства.
• Применение антибиотиков. В этом случае перед сдачей анализа следует проконсультироваться с врачом.

Важные замечания

• Титр антител может «отставать» от самой болезни. Например, человек прошёл курс лечения и выздоровел (т. е. все боррелии в организме погибли). Однако титр антител иногда остаётся высоким ещё некоторое время. Постепенно он снизится, но, возможно, и не достигнет «нулевого» уровня.
• Укус клеща ещё не означает боррелиоз. Во-первых, не все клещи инфицированы. Во-вторых, если присосавшийся клещ был быстро удалён, то B. burgdorferi не успевает попасть к человеку (для этого нужно от 24 до 72 часов контакта с клещом).

Как определить болезнь Лайма у человека

Лабораторные анализы – наиболее информативный способ выявления возбудителей болезни Лайма в организме еще до развития тяжелых симптомов и осложнений.

Чаще всего для диагностики используются так называемые серологические методы диагностики, которые позволяют определить в организме антитела (иммуноглобулина), вырабатывающиеся иммунной системой после попадания возбудителя в кровоток.

Существует несколько разновидностей антител к боррелиозу, каждая из которых вырабатывается на определенном этапе заболевания:

• повышенная концентрация (титр) иммуноглобулинов IgM свидетельствует об остром течении инфекционного процесса, так как они вырабатываются на 2-4 неделе после инфицирования;
• иммуноглобулины IgG наблюдаются на второй-третьей стадии болезни, а длительное присутствие антител к боррелиям этого класса в крови свидетельствует о переходе патологического процесса в хроническое течение.

Анализ сдают через 2 недели после контакта с паразитом, после чего повторяют спустя 20-30 дней, так как на ранних стадиях антитела к боррелиям вырабатываются не у всех пациентов.

Если провести серологическое исследование по какой-либо причине невозможно, для диагностики используются микробиологические методы диагностики, чаще всего ПЦР. Они дают менее точную картину, так как выделить возбудителя из крови и других образцов с помощью такого исследования сложнее.

Как и где сдавать тесты

Если для проведения исследования используется венозная кровь, ее берут в амбулаторных условиях, после чего больной может отправляться по своим делам. Забор спинномозговой и суставной жидкости представляет собой сложную, иногда болезненную процедуру, поэтому для проведения исследования требуется госпитализация.

Чтобы результат анализа был максимально точным, перед процедурой нужно подготовиться придерживаться следующих правил:

• избегать стрессовых ситуаций и чрезмерной физической активности;
• не употреблять жирные и острые продуктыу, а также алкогольные напитки за 72 часа до забора крови;
• за несколько часов до исследования не курить;
• последний прием пищи должен быть не ранее чем за 8-10 часов до сдачи биоматериала.

Кроме того, врачу нужно сообщить обо всех лекарственных препаратах, которые принимает больной, а также об имеющихся заболеваниях.

ВАЖНО! Для выявления клещевого боррелиоза используется не один, а несколько методов диагностики, которые дополняют друг друга, позволяют поставить максимально точный диагноз и определить стадию болезни.

Сдать анализы для выявления болезни Лайма можно в любой частной клинике, примерная стоимость составляет 600-1000 рублей в зависимости от метода проведения диагностики. В государственных больницах исследование проводится бесплатно, но далеко не все медицинские учреждения имеют необходимую для этого аппаратуру и химические вещества.

Серологические методы исследования

Для серологической диагностики методом ИФА используется венозная кровь, которую берут через 2-4 недели после укуса, после чего повторяют через 20-30 дней. Исследование дает достаточно информативную картину заболевания, но иногда требует дополнительных анализов для уточнения диагноза.

Расшифровка анализа крови методом ИФА на боррелиоз

Антитела к боррелиям	Отрицательный результат, ОЕд/мл	Сомнительный результат, ОЕд/мл	Положительный результат, ОЕд/мл
Anti-Borrelia IgM	менее 0,8	0,8-1,1	более 1,1
Anti-Borrelia IgG	менее 16	16-22	более 22

Показатели, или референсные значения в расшифровке результатов анализа крови на болезнь Лайма могут отличаться в зависимости от лаборатории, поэтому для постановки точного диагноза следует обратиться к врачу.

Иммуночип

Технология иммуночип аналогична методу ИФА, и основывается на выявлении в крови больного антител, которые вырабатываются при попадании боррелий в организм. Преимущества методики заключаются в том, что она позволяет получить результат гораздо быстрее, а также имеет не два, а гораздо больше маркеров, поэтому определяет наличие или отсутствие заболевания с большей точностью.

ВАЖНО! Единичный анализ на клещевой боррелиоз не способен дать точный результат даже при использовании инновационных методик – для оценки состояния больного врачи проводят несколько анализов через определенные промежутки времени, чтобы увидеть показатели в динамике.

Другие обследования крови

Помимо серологических исследований, при подозрении на боррелиоз используются бактериологические (культуральные) методы, которые подразумевают выделение возбудителя на питательных средах.

Их ценность при постановке диагноза достаточно низкая, так как боррелии очень требовательны к условиям проведения анализа, а вероятность получения ложного результата возрастает.

Расшифровка результатов таких исследований проста – в зависимости от наличия или отсутствия возбудителей заболевания в биоматериале анализ может быть положительным или отрицательным.

На второй и третьей стадии заболевания больным назначается общий анализ крови, который позволяет выявить воспалительные и инфекционные процессы в организме – характерными маркерами при боррелиозе выступают увеличение СОЭ и повышение концентрации лейкоцитов.

Особое значение анализы крови приобретают при диагностике боррелиоза Миямото, который протекает без кольцевидной эритремы, специфического симптома болезни Лайма, из-за чего выявить его гораздо сложнее. В этом случае больным требуется комплексная диагностика, которая включает разные методы исследования и тщательное наблюдение за состоянием здоровья.

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Методика ПЦР основывается на выявлении фрагментов ДНК боррелий в биологических жидкостях больного (крови, спинномозговой жидкости) и тканях с пораженного участка. Анализ имеет ряд преимуществ, включая доступность, высокую точность результатов и скорость их получения – максимальный срок составляет 72 часа.

Кроме того, с помощью анализа ПЦР можно выявить не только боррелии, но и другие опасные для здоровья патогенные микроорганизмы. Расшифровка исследования после укуса клещем выглядит следующим образом: положительный или отрицательный результат в зависимости от наличия ДНК боррелий в образцах.

ВАЖНО! Положительный результат ПЦР практически в 100% случаев свидетельствует о наличии заболевания и является достаточной основой для назначения немедленного лечения.

Иммуноблот и вестернблот (если ложноотрицательный)

Иммуноблот и вестернблот относятся к наиболее информативным и современным методикам исследования, которые подразумевают выявление в биоматериале больного специфичных белковых соединений.

Они позволяют выявить при диагностике антитела к 10 антигенам патогенных микроорганизмов, определить ее стадию и хроническое течение. Анализ делают через 2-4 недели после укуса, после чего повторяют через месяц для уточнения диагноза и оценки динамики показателей.

Чаще всего вестернблот и иммуноблот используются для диагностики клещевого боррелиоза в комплексе с серологическими методами исследования.

Недостаток этих методик заключается в том, что они достаточно часто дают ложноотрицательный результат, то есть показывают отсутствие заболевания у зараженных людей, что может привести к неправильной постановке диагноза и отсутствию адекватного лечения. Чаще всего такое явление наблюдается у людей с иммунодефицитными состояниями – их организм неспособен дать адекватный ответ на присутствие возбудителя, из-за чего специфические иммунные комплексы в крови отсутствуют.

Проверка клеща на боррелиоз

Если клеща удалось извлечь из тела пострадавшего человека целиком, его доставляют в лабораторию для обследования на наличие возбудителей боррелиоза. Для этого используется метод ПЦР, который позволяет выявить генетический материал боррелий в ДНК паразита. Инфицирование клеща не свидетельствует на 100% о том, что укушенный человек был заражен заболеванием, но для предотвращения неприятных последствий его помещают под строгий медицинский контроль и проводят профилактическое лечение антибактериальными препаратами.

Когда и как выполняется процедура

Если пациент проконтактировал с зараженным человеком или же был укушен клещом, инкубационный период заболевания после инфицирования будет длиться до семи дней. Потом болезнь начинает активно развиваться — эта стадия может длиться от трех до тридцати трех суток.

Обычно направление на данный анализ крови дается в таких случаях:

1. При обнаружении на теле человека клещей или следов от их укусов.
2. Если первичный анализ был неточным, результат сомнительный или есть основания предполагать, что исследование крови провели и расшифровали некорректно.
3. Когда нужно провести дифференциальную диагностику и исключить другие заболевания неврологического характера.
4. Для того чтобы оценить, насколько эффективна проводимая терапия.

1. Вначале нужно взять сырье — кровь из вены пациента.
2. После этого кровь помещается в колбу — в некоторых лабораториях в сырье сразу же добавляют специальный гель.
3. Затем проводится серологическое исследование. Его цель — обнаружить антитела М и G, которые начинают продуцироваться в ответ на распространение микроорганизмов. Для этого применяется метод ИФА.

В 50% случаев результаты анализов на боррелиоз не показывают присутствия антител в крови пациента. Но это не означает, что человек точно не инфицирован. Поэтому спустя еще 3—4 недели анализ делают повторно.

Специальная подготовка к забору крови для этого исследования не нужно. Результаты можно получить уже через 1—2 дня, в большинстве районных поликлиник анализ делается бесплатно. В частных клиниках услуга оплачивается согласно тарифам медицинского учреждения.

Что встречается чаще?

На территории России каждый год регистрируется от шести до восьми тысяч новых случаев боррелиоза, а энцефалит встречается реже – пять-шесть тысяч диагнозов.

Клещевой энцефалит вызывается вирусом семейства флавивирусов (группа арбовирусов), переносится укусами европейского лесного и таёжного иксодовых клещей, хотя зафиксированы также случаи заражения через желудочно-кишечный тракт из-за употребления сырого молока инфицированных животных (овец, коров, коз). По мере того как развивается вирус, в сосудах и оболочках мозга происходят медленные, но часто имеющие необратимый характер изменения.

Сначала болезнь симптоматически не выражена, но к третьей неделе наблюдается повышение температуры, мышечные и головные боли, ухудшение аппетита, тошнота. Четверть пациентов чувствует эти признаки ещё позже, по прошествии месяца. Со временем боли становятся сильнее, появляются паралич конечностей, судороги, потеря сознания, дезориентация, кома. Если помощь отсутствует, может наступить летальный исход. Анализ крови поможет выявить болезнь своевременно.

Различают несколько форм протекания клещевого энцефалита, зависящих от разных симптомов. Самые тяжёлые зафиксированы на Дальнем Востоке, лёгкие преобладают в центрально-европейской части России.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Сроки получения результатов

Анализ на боррелиоз относится к срочной категории. Чем раньше будет проведено лечение, тем меньше осложнений для пациента. Поэтому результаты выдают в день забора биоматериала.

Читать:   Мазок из зева и носа: техника взятия, анализ и расшифровка результатов

Симптомы

Инкубационный период болезни длится от нескольких дней до месяца. Отмечается и асимптомное течение болезни.

Условно болезнь можно разделить на 2 периода:ранний и поздний.

Ранний период

Средняя длительность этого периода – неделя. В это время состояние больного характеризуется типичными инфекционными симптомами – это повышенная температура тела (до 40), озноб, тошнота, выраженная слабость, повышенная утомляемость.

В этот период главным отличительным проявлением боррелиоза является возникновение кольцевидного покраснения, иначе называемого мигрирующей эритемой. Возникает она на месте укуса клеща и имеет тенденцию к разрастанию.

При этом больной ощущает боль и жжение в ее области; эритема, как правило, возвышается над участками не пораженной кожи.

Зачастую диагностика клещевого боррелиоза может быть затруднена, так как появление эритемы необязательно. В этом случае врачи прибегают к лабораторной диагностике.

Ранний период может закончиться благоприятно для больного, который вовремя начал антибактериальное лечение.

Поздний период (условно делится на две стадии)

I стадия

Этот период болезни связан с возникновением характерных неврологических и кардиальных симптомов. Актуальность они приобретают примерно через месяц со времени заражения.

Неврологическая симптоматика. Характерно возникновение менингита, невритов черепных нервов, ретикулоневритов в сочетании с пульсирующей головной болью, фотофобией. Лихорадочные симптомы не проявляются.

Кардиальные проявления. Менее специфичны, чем неврологические. Несмотря на это, желательно всем больным производить снятие ЭКГ на случай обнаружения атриовентрикулярной проводящей блокады, а также мио- и перикардита. Кроме того, хакрактерно учащенное сердцебиение, боли в груди и головокружения.

Так же вам может быть интересно:

1. Что такое экзема, почему она возникает, лечение рук с помощью мазей и примочек.
2. Грибковое заболевание: микоз гладкой кожи читайте тут.
3. Как лечить псориаз волосистой части головы -мази,шампуни, средства народной медицины
   http://idermatolog.net/boleznikogi/dermatiti/kak-lechit-psoriaz-golovy.html

II стадия

Характерным признаком этого периода болезни являются воспалительные поражения суставов, а также кожи. Поражение суставов обычно проявляется как хронический Лайм-артрит, характеризующийся поражением всех окружающих сустав структур. Поражение кожи проявляется в появлении цианотично-красных пятен в местах сгибательных поверхностей.

Зачем проводится анализ?/Повышение и понижение показателей

Когда назначается исследование?

Тест назначается при симптомах клещевого боррелиоза. На ранних стадиях могут отмечаться:

• мигрирующая эритема,
• повышенная температура, озноб,
• головная боль,
• быстрая утомляемость,
• тошнота.

Дополнительным показанием к анализу является укус клеща (за несколько дней или недель до появления первых симптомов). В ряде случаев даже удается проверить на B. burgdorferi самого клеща. Если результат положителен (т. е. клещ является переносчиком боррелиоза), то укушенному человеку следует сдать анализ самому (обнаружить антитела можно будет через несколько недель).

Симптомы боррелиоза на более поздних стадиях:

• периодическая боль в суставах, костях и мышцах,
• менингит,
• паралич лицевого нерва,
• онемение конечностей,
• расстройства памяти,
• поражения глаз и сердца (в редких случаях).

Кроме того, анализ назначается при необходимости убедиться в успешности лечения

Лечится ли энцефалит?

Вылечить энцефалит возможно, но для этого требуется большое количество лекарств и методов. В данном случае нет определённого вида лечения, приводящего к выздоровлению. Терапия проводится исключительно в стационаре с назначением патогенетических, этиотропных и симптоматических препаратов. Комплексно прописываются также лекарства, обладающие противовоспалительным, иммунологическим, противовирусным, гормональным, противосудорожным, нейропротекторным, психотропным и другими действиями. После этого назначают восстановительное лечение: это лечебная физкультура, психо- и трудотерапия, логопедия и т.п. В течение нескольких лет могут быть судороги, симптомы атрофии мышц, деградации когнитивной функции и прочие расстройства ЦНС. Порой последствия могут остаться на всю оставшуюся жизнь.

Стоит отметить, что наиболее эффективная защита от энцефалита – это собственные антитела человека, которые организм вырабатывает после введения вакцины в осенний период, за полгода до начала опасного сезона. Повсеместно назначаются также прививки, содействующие быстрой профилактике: три дозы в течение двадцати одного дня, дающие до 97% гарантии защиты.

Проверка клеща на боррелиоз

При укусе клеща нежелательно самостоятельно снимать насекомое с поверхности кожи. Человек должен обратиться в травмпункт. Там его снимут по всем правилам, отправят в лабораторию на исследование. Список анализов идентичен человеческим. Лаборант выявляет ДНК инфекции с помощью анализа клеща на боррелиоз.

Ложноположительный результат

Возможно появление ложноположительного результата, если пациент раннее болел боррелиозом, сифилисом, мононуклеозом. Поэтому проводят 2-3 теста для исключения постановки ложного диагноза.

Для получения достоверной информации через 2-4 недели после укуса клеща назначают забор ликвора. При болезни инфекция находиться в спинномозговой жидкости в повышенных количествах.

Расшифровка анализа на антитела IgG

Расшифровка значений следующая:

• Меньше 10 Ед/мл — «отрицательно» (инфекция отсутствует или анализ был сдан в ранние сроки).
• От 10 до 15 — «сомнительно».
• Выше 15 — «положительно». Такой результат может указывать также на перенесенную болезнь и наличие у пациента бактериального эндокардита, сифилиса, мононуклеоза или других заболеваний. Анализ крови на боррелиоз лучше повторить через одну-две недели.

Когда сдавать анализ на боррелиоз после укуса?

Не стоит бежать сдавать анализы на клещевой энцефалит и боррелиоз сразу же после укуса клещом. Дело в том, что в ранний период анализ не будет достаточно информативным. При использовании метода ПЦР кровь можно исследовать не ранее, чем через 10 дней после того как паразит укусил вас. Проверка на антитела к боррелиям проводится ещё позже – через 3-4 недели.

Эритема после укуса клеща, инфицированного боррелиозом

Очень информативным может оказаться изучение специалистами и самого клеща, который укусил человека. Сложность здесь заключается в том, что часто люди забывают о том, что сам паразит может быть очень полезным для установления точного диагноза.

Если вы не знаете, где можно сдать кровь на боррелиоз, то достаточно обратиться в любую поликлинику вашего города. Однако уточните, проводит ли выбранное учреждение анализы на боррелиоз. Дело в том, что некоторые поликлиники специализируются только на выявлении энцефалита. Проблема в том, что клещи могут являться переносчиками сразу двух заболеваний.

Сама процедура сдачи анализов платная, обойдется она в 500-1500 рублей. Стоимость зависит непосредственно от самой клиники и скорости получения результатов. Если анализ берется на два заболевания одновременно, то стоимость услуги может увеличиться вплоть до 2 тысяч рублей.

Каких-то серьезных требований к подготовке перед сдачей анализов на боррелиоз нет, но для повышения точности результатов стоит выполнить несколько рекомендаций:

• за 7 часов до сдачи анализа лучше ничего не есть;
• запрещено употреблять алкоголь за сутки до процедуры;
• лучше не курить за полчаса до забора крови.

В редких случаях для определения заболевания может потребоваться дополнительный анализ спинномозговой жидкости. Этот метод подходит далеко не всем, так как имеет противопоказания. Процедура достаточно болезненна.

ПЦР методы

Метод ПЦР крови человека.
Используют для ранней диагностики заболевания. Определяют генотип вируса в активной и погибшей форме.

ПЦР клеща.
После укуса живое или мертвое насекомое доставляют в лабораторию. Определяют наличие ДНК возбудителя боррелиоза.

Иммуночип

Технология определения множества маркеров появления антигена боррелиоза в крови. Тест определяет наличие инфекции с высокой точностью, результаты получают быстрее, чем при других исследованиях.

Серологические методы исследования

Для тестирования используют венозную кровь, которую сдают через 2-4 недели после укуса. Для предотвращения ложноотрицательного результата анализ повторяют через 1 месяца. Определяют количество антител только к патогенным микроорганизмам.

Методика вестерн блот

Применяют при подозрении на ложноотрицательный результат других исследований или при наличии антител к боррелиозу от предыдущего заболевания. Используют 10 антигенов боррелиоза, подбирая к ним антитела из крови пациента.

Отзывы/Мнения об анализе

— смотрите ниже в КОММЕНТАРИЯХ

Ложноположительный результат

Вероятность получения ложноположительного результата составляет 5-10% даже при использовании современных диагностических методик. В таких случаях анализы показывают наличие патогенных микроорганизмов у людей, которые не были заражены боррелиями.

Обычно ложноположительные результаты наблюдаются при наличии у больного других инфекций, вызванных деятельностью спирохет (например, сифилиса), но иногда их причина остается невыясненной.

СПРАВКА! Результаты разных исследований у одного человека могут значительно отличаться друг от друга, особенно если они были сделаны в разных лабораториях – это связано с качеством и чувствительностью реагентов, которые используются для проведения анализов.